豚鼠內(nèi)皮素(ET-)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒 產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:  內(nèi)皮素ELISA試劑盒  英文名稱：guinea pig Endothelin ,ET- ELISA Kit現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量問(wèn)題可包換包退，免除您的后顧之憂，所有的elisa試劑盒——免費(fèi)代測(cè)，全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。豚鼠內(nèi)皮素(ET-)elisa檢測(cè)試劑盒48Ｔ/96Ｔ。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
包裝：液體盒裝（48T/96T）
貯藏：2—8°C，避光防潮保存。
有效期：6個(gè)月
內(nèi)皮素ELISA試劑盒檢測(cè)中樣品的處理
．細(xì)胞培養(yǎng)物上清：細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫000g，離心0分鐘后收集上清，并將標(biāo)本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．血清：標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于000g，4℃離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,000g離心5分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
4．尿液：無(wú)菌收集取初尿，離心除去沉淀物，即可用于檢測(cè)，要保存尿樣，可以加入0.05％的NaN3在4-8℃保存，或加入尿樣冰凍保護(hù)液放入-20℃冰箱保存。
5．組織勻漿：將組織標(biāo)本先用PBS洗滌，除去多余血液，勻漿化后放在PBS于-20℃放置過(guò)夜，再經(jīng)過(guò)二次反復(fù)凍融破膜，5000g，4℃離心5分鐘，取上清即可檢測(cè)。注：取樣和樣品處理過(guò)程中，防止有毒物質(zhì)對(duì)操作人員的危害，要采取相應(yīng)的保護(hù)措施。
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒(間接法)
() 抗原包被：用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應(yīng)板，每孔00μl，同時(shí)設(shè)陰性細(xì)胞培養(yǎng)物對(duì)照孔，置4℃過(guò)夜。
(2) 洗滌：用洗滌液洗滌2次，每次2min，瀝干。
(3) 加入被檢血清：用保溫液將被檢血清作∶00稀釋，加入反應(yīng)板相鄰的兩個(gè)孔中，每孔00μl。同時(shí)作陰、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)血清對(duì)照，置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次：方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物：用保溫液將酶結(jié)合物作∶4 000稀釋，加入反應(yīng)孔中，每孔00μl，置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次：方法同上。
(7) 加入底物：每孔00μl，置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液：每孔50μl，靜置5min。
(9) 測(cè)定OD值：用檢測(cè)儀，于492nm波長(zhǎng)，按儀器使用及制定標(biāo)準(zhǔn)要求調(diào)節(jié)儀器，測(cè)定各反應(yīng)孔的OD值，記錄結(jié)果。
 

內(nèi)皮素ELISA試劑盒操作步驟：
. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。
注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 00ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 00ul 的蒸餾水；其余微孔中加入00ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 50ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 5-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 0-5 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。