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內(nèi)皮素ELISA試劑盒實驗操作流程介紹

更新時間:2022-05-16 點擊量:339
       內(nèi)皮素ELISA試劑盒切勿冷凍,避免陽光直曬。未使用完的酶標板條應(yīng)密封,2-8℃保存,具有方便、快速、靈敏等特點,因其性質(zhì)、使用方便、價格低廉等特點。
  檢測中樣品的處理
  1.細胞培養(yǎng)物上清:細胞培養(yǎng)物于室溫000g,離心0分鐘后收集上清,并將標本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復凍融。
  2.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于000g,4℃離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
  3.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,000g離心5分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
  內(nèi)皮素ELISA試劑盒實驗操作流程:
  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
  4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

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