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青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒

【概要描述】青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。

型號: 點擊量:769 廠商性質:代理商 更新日期:2019-04-11
產品詳情

性能指標:點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月產品名稱:青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)PCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。

 

使用方法:
一、青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
?50ml圓底插口離心管(國產)英文名(EN):DL-Asparagine monohydrate,≥99.0%CAS No.:330-87-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑

50ml圓底螺口離心管(國產)英文名(EN):D-Glutamic acid,≥99%CAS No.:6893-26-規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑

50mm微孔濾膜(國產,0.22μm/0.45μm)  英文名(EN):L-Glutamic acid monosodium salt hydrat...CAS No.:536304規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑

5M NaCl英文名(EN):DL-Glutamine,99%CAS No.:825942規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑

5ml凍存管有機玻璃架  英文名(EN):DL-Isoleucine,99%CAS No.:443-79-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑

5ml外旋凍存管(國產)英文名(EN):DL-Leucine,≥99%CAS No.:328-39-2規(guī)格(SP):0G類別(Key):通用試劑

5ml吸頭(用于大龍,百得,Eppendorf移液器)英文名(EN):D-Lysine monohydrochloride,≥98%CAS No.:7274-88-6規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑

5ml圓底連蓋離心管英文名(EN):DL-Phenylalanine, 99%CAS No.:50-30-規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑

6×DualColorDNA loading buffer英文名(EN):α-Galactosidase from green coffee beansCAS No.:9025-35-8規(guī)格(SP):5UN類別(Key):通用試劑

6×MonoColor DNA loading buffer(單染料)英文名(EN):Glucose-6-phosphate Dehydrogenase from...CAS No.:900-40-5規(guī)格(SP):00UN類別(Key):通用試劑

6×TriColor DNA loading buffer(三染料)英文名(EN):5′-Nucleotidase humanCAS No.:9027-73-0規(guī)格(SP):500U類別(Key):通用試劑

6-BA/6-芐氨基嘌呤英文名(EN):4-Nitrophenyl α-D-galactopyranosideCAS No.:7493-95-0規(guī)格(SP):00MG類別(Key):通用試劑

6-芐氨基嘌呤溶液(6-BA)英文名(EN):2-Nitrophenyl β-D-glucopyranosideCAS No.:286-24-2規(guī)格(SP):00MG類別(Key):通用試劑

6-磷酸果糖鈉鹽(6-P-F)英文名(EN):4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosamin...CAS No.:3459-8-5規(guī)格(SP):00MG類別(Key):通用試劑

6-磷酸葡萄糖鈉鹽(6-P-G)英文名(EN):α-Glycerophosphate dehydrogenaseCAS No.:9075-65-4規(guī)格(SP):200UN類別(Key):通用試劑

700μl比色皿  英文名(EN):Myokinase from chicken muscleCAS No.:25980規(guī)格(SP):KU類別(Key):通用試劑

7ml圓底連蓋離心管英文名(EN):Pyruvate Kinase from rabbit muscleCAS No.:900-59-6規(guī)格(SP):KU類別(Key):通用試劑

96孔PCR板(國產)英文名(EN):Glycerokinase from Bacillus stearother...CAS No.:9030-66-4規(guī)格(SP):KU類別(Key):通用試劑
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注意事項:
青蟹雙順反子病毒PCR檢測試劑盒加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

 

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