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海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒RNA質量檢測

更新時間:2021-05-26 點擊量:547

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒RNA質量檢測:
)紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(:00)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
濃度測定
A260下讀值為表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。具體計算如下:
RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,:00稀釋至495的TE中,測得A260 = 0.2
RNA 濃度= 0.2 ×00 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g
取5ul用來測量以后,剩余樣品RNA為35 l,剩余RNA總量為:
35 l × 0.84 gl = 29.4 g
②純度檢測
RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍.8到2.。
2)變性瓊脂糖凝膠電泳測定
①制膠
g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃,0 ml的0× MOPS電泳緩沖液和8 ml的37% (2.3 M)。
0×MOPS電泳緩沖液
濃度 成分
0.4M MOPS,pH 7.0
0.M 乙酸鈉
0.0M EDTA
灌制凝膠板,預留加樣孔至少可以加入25 l溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內,加足量的×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個毫米。

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