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推薦產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱:內(nèi)羅畢羊病病毒PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Nairobi Sheep Disease Virus(NSDV)RTPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標(biāo):點擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.內(nèi)羅畢羊病病毒PCR檢測試劑盒價格試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
使用方法:
一、內(nèi)羅畢羊病病毒PCR檢測試劑盒價格樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
內(nèi)羅畢羊病病毒PCR檢測試劑盒價格參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?甲基英文名(EN):3-Fluoropyridine-2-carboxaldehyde,98%CAS No.:3224-43-8規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
黃芪皂苷III英文名(EN):Imidazole-2-carboxaldehyde,97%CAS No.:0-08-7規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
黃腐酚英文名(EN):-Boc-piperidine-3-carboxaldehyde,97%CAS No.:856-93-7規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
黃獨素B英文名(EN):4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-(N-me...CAS No.:478-37-4規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
環(huán)氧續(xù)隨子醇英文名(EN):4-Isoquinolinecarboxaldehyde,97%CAS No.:22960-6-3規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
英文名(EN):5-Chloro-,3-dimethyl-H-pyrazole-4-ca...CAS No.:27006-76-4規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
槲皮素-7-O-葡萄糖苷英文名(EN):,'-Ferrocenedicarboxaldehyde,96%CAS No.:27-48-3規(guī)格(SP):500MG類別(Key):通用試劑
E英文名(EN):-Methyl-2-imidazolecarboxaldehyde,98%CAS No.:3750-8-7規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
B英文名(EN):Benzo[b]thiophene-2-carboxaldehyde,97%CAS No.:354-37-5規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
胡黃連苷III英文名(EN):Bromomalonaldehyde,97%CAS No.:2065-75-0規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
黑芥子苷英文名(EN):6-Methoxy-2-naphthaldehyde,98%CAS No.:3453-33-6規(guī)格(SP):500MG類別(Key):通用試劑
和厚樸酚英文名(EN):2-Ethoxybenzaldehyde,96%CAS No.:63-69-4規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
漢英文名(EN):2,3,6-Trifluorobenzaldehyde,96%CAS No.:0445-70-9規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
鉤吻素子英文名(EN):4-Methoxy-2-(trifluoromethyl)benzaldeh...CAS No.:0632-36-規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
鉤吻堿英文名(EN):2-Fluoro-4-(trifluoromethyl)benzaldehy...CAS No.:89763-93-9規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
根皮素英文名(EN):2-Fluoro-5-nitrobenzaldehyde,97%CAS No.:27996-87-8規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
高香草酸英文名(EN):3-Fluoro-4-methoxybenzaldehyde,99%CAS No.:35-54-2規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
甘草次酸英文名(EN):2-Chloro-3-(trifluoromethyl)benzaldehy...CAS No.:938-03-7規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
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企業(yè)信息
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3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
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