小鼠破骨細(xì)胞分化因子 ELISA試劑盒 使用說明書
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè)，7個(gè)工作日出結(jié)果，提供原始數(shù)據(jù)！
檢測(cè)范圍：每種的檢測(cè)范圍都有所不同,具體請(qǐng)查看說明書
特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的指標(biāo)，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
有效期：6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法檢測(cè)指標(biāo)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。
小鼠破骨細(xì)胞分化因子 ELISA試劑盒 操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)20分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 00μl（取μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 產(chǎn)品名中文（英文）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 00μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
本品用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗HVA抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。. 酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱）2. 微量加液器及吸頭，EP管3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙
標(biāo)記抗體的稀釋原則：
臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔00μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.-0.2ml。如0μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。 . 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：×0ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：×0ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：×20μl/瓶（：00）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：×20μl/瓶（：00）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：×0ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
0. 終止液（Stop Solution）：×0ml/瓶（2N H2SO4）。
公司其他類別試劑盒展示：
兔子組織型纖溶酶原激活劑（t-PA）ELISA試劑盒 rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA試劑盒
小鼠孤腓肽（OFQ/N）ELISA試劑盒 Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA試劑盒
小鼠蛋白磷酸酶（PP）ELISA試劑盒 Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA試劑盒
小鼠硫氧還蛋白還原酶（TrxR）ELISA試劑盒 Mouse thioredoxin reductase,TrxR ELISA試劑盒
小鼠硫氧化還原蛋白（Trx）ELISA試劑盒 Mouse Thioredoxin,Trx ELISA試劑盒
小鼠膠原酶II（Collagenase II）ELISA試劑盒 Mouse Collagenase Type II ELISA試劑盒
小鼠膠原酶I（Collagenase I）ELISA試劑盒 Mouse Collagenase I ELISA試劑盒
小鼠磷酸化蛋白激酶C（P-PKC）ELISA試劑盒 Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA試劑盒
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（pERK）ELISA試劑盒 Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA試劑盒
小鼠鈣通道阻滯劑（CCB）ELISA試劑盒 Mouse calcium channel blockers,CCB ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT/GPT）ELISA試劑盒 Mouse Alanine Aminotransferase,ALT/GPT ELISA試劑盒
小鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA試劑盒 Mouse bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA試劑盒
小鼠結(jié)合蛋白4（RBP-4）ELISA試劑盒 Mouse Retinol-binding protein 4,RBP-4 ELISA試劑盒