小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，用抗小鼠INS抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的小鼠INS會(huì)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入化的抗小鼠INS抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。

　　抗小鼠INS抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠INS結(jié)合、與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，INS濃度與OD450值之間呈正比，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中INS的濃度。

　　Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間注意事項(xiàng)：

　　、在備孔稀釋好待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品；

　　2、上板:應(yīng)從后一孔上完板開(kāi)始計(jì)時(shí)，以確保反應(yīng)時(shí)間；

　　3、加底物：應(yīng)從加第一孔開(kāi)始計(jì)時(shí)，以確保加終止液時(shí)的反應(yīng)時(shí)間是5分鐘。

　　小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

　　）試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

　　2）實(shí)驗(yàn)中不用的試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

　　2）實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

　　3）不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

　　4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

　　5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

　　6）洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

　　7）底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

　　8）加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

　　9）按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。