小鼠角化細胞內分泌因子檢測/雙調蛋白  KAF/雙調蛋白使用說明書elisa法測定
規格：48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關生物液體中小鼠角化細胞內分泌因子檢測/雙調蛋白  KAF/雙調蛋白的含量。
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 操作步驟 實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的小鼠角化細胞內分泌因子檢測/雙調蛋白  KAF/雙調蛋白 檢測范圍。 

. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl，余孔分別加標準品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應20分鐘。 

為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標記抗體工作液 00μl（取μl標記抗體加99μl標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。 

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。  

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同標記抗體工作液） 00μl，37℃，60分鐘。 

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。 

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后5分鐘以內進行檢測。