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大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

【概要描述】大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:COR-L23/CPR非小細(xì)胞肺癌大鼠鼻腔粘膜上皮細(xì)胞大鼠眼外肌成纖維細(xì)胞大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞大鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠胚胎成纖維細(xì)胞大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

型號: 點擊量:553 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-19
產(chǎn)品詳情

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源

肺動脈組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0727

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣


大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

大鼠肺大動脈平滑肌分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。肺大動脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。
方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠肺大動脈平滑肌采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠肺大動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實驗器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進行計數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FAK

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FER

小鼠雜交瘤細(xì)胞;Fibulin5

水溶性花生餅粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FGFR4

麥芽浸粉(發(fā)酵專用)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;Foxp3

發(fā)酵專用黃豆餅粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;FKHR

發(fā)酵用花生餅粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;GAPDH

發(fā)酵用精制黃豆餅粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;GATA3

40%半乳糖溶液(過濾除菌)

甲基單抗細(xì)胞;Met-1

發(fā)酵專用豆粕粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HBKC-4G3

白色玉米漿粉

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB23M-D9

髓鞘染色試劑盒(牢固藍(lán)-伊紅法)

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HBKC-4

蘇丹Ⅲ染色液

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1

蘇丹IV飽和溶液

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB11A-A11

大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞蘇丹Ⅳ染色液

人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞;HLCL9B10

磷脂鐵蘇木染色試劑盒(FeH法)

DS-1001b

Weil髓鞘染色試劑盒


大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。




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