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MRC-5(人正常胚肺成纖維細胞)細胞潛伏期(latent phase):細胞接種后,先經(jīng)過一個在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時,細胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束. 細胞貼壁速度與細胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細胞貼壁速度慢,可達0-24 小時或更多,而傳代細胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細胞貼壁后還需經(jīng)過一個潛伏階段,才進入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細胞潛伏期,約24-96 小時或更長,連續(xù)細胞系和腫瘤細胞潛伏期短,僅需6-24 小時。
細胞指數(shù)增生期(logarithmic growth phase) 這是細胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細胞增多。指數(shù)增生期細胞分裂相數(shù)量可作為判定細胞生長是否旺盛的一個重要標志。通常以細胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細胞群中每000 個細胞中的分裂相數(shù)。一般細胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細胞和腫瘤細胞分裂相指數(shù)可高達3%-5%。MRC-5(人正常胚肺成纖維細胞)指數(shù)增生期的細胞是細胞活力時期,是進行各種實驗*時期,也是凍存細胞的時機。在接種細胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5 天后,隨著細胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少,zui后細胞相互接觸匯合成片。
正常細胞相互接觸后能抑制細胞運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細胞向三維空間擴展,使細胞發(fā)生堆積(piled up)。細胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細胞仍能進行增殖分裂,因此細胞數(shù)仍然在增多。但是,當細胞密度進一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細胞因營養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
培養(yǎng)細胞注意事項:
實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:0055 蛋白酶K/Proteinase K 層析純,30u/mg 00毫克 Merck 原裝 39450-0-6 39450-0-6蛋白酶K 蛋白酶K Proteinase K
生物技術(shù)級,30u/mg 00毫克 Amresco原裝
BR,30u/mg 00毫克 Roche原裝
0056 0mg/ml蛋白酶K溶液/Proteinase K solution PCR級,600u/ml 毫升 39450-0-6 39450-0-60mg 0mg/ml蛋白酶K溶液 Proteinase K solution
5毫升
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0057 抑制劑/抑肽素/五肽衍生物/Pepstatin/Pepstatin A 超純,75%,管制品 0毫克 進分 6305-03-3 6305-03-3抑制劑 抑制劑 Pepstatin A
00毫克 進分
500毫克 進分
0058 核糖核suan"酶抑制劑/ RNA酶抑制劑/Rnasin Inhibitor BR,40u/ul,管制品 KU 進分 核糖核suan"酶抑制劑 核糖核suan"酶抑制劑 Rnasin Inhibitor
5KU 進分
0KU 進分
0059 抑制劑/SBTI/STI/Trypsin inhibitor(soybean) BR,4000BAEEu/mg,大豆,管制品 500毫克 國產(chǎn) 9035-8-8 9035-8-8抑制劑 抑制劑 Trypsin inhibitor(soybean)
BR,000BAEEu/mg,櫓豆,管制品 5毫克 國產(chǎn)
00毫克 國產(chǎn)
企業(yè)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研實業(yè)有限公司
3004918891發(fā)送信件產(chǎn)品分類
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