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產品名稱 | 大鼠腎上腺皮質細胞 | 組織來源 | 腎上腺組織 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 包裝 | T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X1365 | 細胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
大鼠腎上腺皮質分離自腎上腺組織；腎上腺是人體相當重要的內分泌器官，由于位于兩側腎臟的上方，故名腎上腺。腎上腺左右各一，位于腎的上方，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形，右腎上腺為三角形。從側面觀察，腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分，周圍部分是皮質，內部是髓質。腎上腺內部是髓質部分，分泌腎上腺素和去甲腎上腺。這些激素在應激狀態(tài)釋放增多，能夠幫助升高血壓，加快心率，升高血糖，動員全身的儲備物質，為機體與外界環(huán)境的抗爭作好充分準備。腎上腺外部是皮質部分，分泌醛固酮、皮質和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數(shù)量的醛固酮，對維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌，會導致高血壓和低血鉀。皮質是人體必需的激素之一。當人體處于應激狀態(tài)時，比如感冒，發(fā)燒，遇到突發(fā)事件的時候，腎上腺皮質分泌大量的皮質，這些皮質能夠動員機體的存儲能源，為應對內部或者外部重要事件提供充分的物質準備。當皮質缺乏時，機體在遇到重大事件的時候，往往缺乏足夠應對能力，容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產生的雄激素，對男性來講，并非不可少，但是對女性而言，是雄激素的一個重要來源。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-3代左右；2代以內狀態(tài)
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
準備工作
1. 實驗器材準備：準備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術器械等，并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。
2. 試劑準備：配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶（如、膠原酶等）、胎牛血清、雙抗等試劑，確保其無菌且在有效期內。
3. 實驗動物或組織來源準備：根據(jù)實驗需求，選擇合適的動物并進行相應的麻醉或處死，獲取所需組織；或從已有的組織樣本庫中獲取組織。
取材與處理
1. 取材：在無菌條件下，迅速取出目標組織，盡量減少對組織的損傷，并去除多余的脂肪、結締組織等非目的組織。
2. 清洗：將取出的組織用預冷的無菌PBS沖洗數(shù)次，以去除血液和雜質。
3. 剪切：將組織剪成約1 - 2mm3的小塊，以便后續(xù)消化。
細胞分離
1. 消化：將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中，在37℃恒溫搖床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管，使消化更均勻。
2. 終止消化：當組織塊大部分被消化成單細胞懸液或小細胞團時，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。
3. 過濾與離心：用細胞篩過濾細胞懸液，去除未消化的組織碎片，然后將濾液以適當?shù)霓D速離心，收集細胞沉淀。
細胞觀察與檢測
1. 日常觀察：每天用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等，記錄細胞的變化情況，如發(fā)現(xiàn)細胞污染或異常，及時采取相應措施。
2. 細胞計數(shù)與活力檢測：在需要時，可采用臺盼藍染色等方法對細胞進行計數(shù)和活力檢測，以了解細胞的生長情況和健康狀態(tài)。
小鼠腦血管周細胞 | 小鼠內皮祖細胞 |
小鼠皮膚成纖維細胞 | 碘海雜質Ⅰ |
小鼠脾基質細胞 | 碘海雜質Ⅲ |
小鼠脾源性內皮祖細胞 | 氯氧 |
小鼠脾臟CD4+T細胞 | 卡比多 |
小鼠破骨細胞 | 鹽曲普利啶 |
小鼠氣管平滑肌細胞 | 鹽曲普利啶順式異構體 |
大鼠骨骼肌成肌細胞；L6 | 1，6-二氫-2-甲基-6-氧代-（3，4’-二吡啶）-5-酰胺（米力雜質A） |
小鼠前列腺成纖維細胞 | 氨甲?；芈壤姿?/span> |
小鼠前列腺上皮細胞 | 枸地氯雷他 |
小鼠前脂肪細胞 | 鹽貝凡洛爾 |
小鼠乳腺成纖維細胞 | Iguratimod |
小鼠乳腺導管上皮細胞 | 大鼠腎上腺皮質細胞 |
小鼠乳腺上皮細胞 | 奧美拉鎂 |
96孔FiltrEX濾板，白色，PS（聚苯乙烯），0.2um孔徑PVDF（聚偏氟乙烯）親水膜，未滅菌 | 群地雜Ⅰ |
一、取材與分離
1. 快速操作
- 組織取材后需立即處理，避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。
- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織，去除血液、雜質。
2. 消化酶選擇
- 根據(jù)組織類型選擇消化酶，避免過度消化導致細胞損傷。
- 消化時間需嚴格控制（通常 10-30 分鐘），可通過顯微鏡觀察細胞解離狀態(tài)。
二、培養(yǎng)條件優(yōu)化
1. 培養(yǎng)基選擇
- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分細胞需添加胰島素、EGF 等。
- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次，減少細胞適應壓力。
2. 貼壁與傳代
- 原代細胞貼壁能力較弱，可能需要包被培養(yǎng)皿（如膠原蛋白、多聚賴氨酸）。
- 傳代時密度建議控制在 70%-80%，過度匯合會導致接觸抑制和分化。
三、污染控制
1. 無菌操作
- 全程在超凈臺操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培養(yǎng)基中可添加雙抗，但長期使用可能影響細胞活性。
2. 支原體檢測
- 定期檢測支原體污染（如 PCR 法），污染后需及時丟棄細胞。
四、狀態(tài)監(jiān)控
1. 日常觀察
- 每天檢查細胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色，及時更換培養(yǎng)基（通常每 2-3 天換液一次）。
- 異常形態(tài)（如細胞變圓、碎片增多）可能提示污染或營養(yǎng)不足。
2. 傳代與凍存
- 原代細胞分裂次數(shù)有限（一般 5-10 代），需及時凍存早期代次細胞。
- 凍存液建議使用 DMSO+血清（或專用凍存培養(yǎng)基），梯度降溫后液氮保存。
