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產品名稱 | 大鼠陰道壁成纖維細胞 | 組織來源 | 陰道組織 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 包裝 | T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X1426 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
大鼠陰道壁成纖維分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜。1）黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚，為復層鱗狀上皮，從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2）肌層由平滑肌組織構成，肌束排列不規則，縱行和環形互相交錯。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環形的橫紋肌稱括約肌。3）外膜層為纖維膜，由結締組織構成，內含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和神經。大鼠陰道壁成纖維主要分離自外膜層，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠陰道壁成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右；3代以內狀態
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
準備工作
1. 實驗器材準備：準備無菌的培養皿、培養瓶、移液管、離心管、手術器械等，并進行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。
2. 試劑準備：配制或購買合適的培養基、消化酶（如、膠原酶等）、胎牛血清、雙抗等試劑，確保其無菌且在有效期內。
3. 實驗動物或組織來源準備：根據實驗需求，選擇合適的動物并進行相應的麻醉或處死，獲取所需組織；或從已有的組織樣本庫中獲取組織。
取材與處理
1. 取材：在無菌條件下，迅速取出目標組織，盡量減少對組織的損傷，并去除多余的脂肪、結締組織等非目的組織。
2. 清洗：將取出的組織用預冷的無菌PBS沖洗數次，以去除血液和雜質。
3. 剪切：將組織剪成約1 - 2mm3的小塊，以便后續消化。
細胞分離
1. 消化：將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中，在37℃恒溫搖床或培養箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管，使消化更均勻。
2. 終止消化：當組織塊大部分被消化成單細胞懸液或小細胞團時，加入含血清的培養基終止消化。
3. 過濾與離心：用細胞篩過濾細胞懸液，去除未消化的組織碎片，然后將濾液以適當的轉速離心，收集細胞沉淀。
細胞觀察與檢測
1. 日常觀察：每天用倒置顯微鏡觀察細胞的形態、生長狀態、密度等，記錄細胞的變化情況，如發現細胞污染或異常，及時采取相應措施。
2. 細胞計數與活力檢測：在需要時，可采用臺盼藍染色等方法對細胞進行計數和活力檢測，以了解細胞的生長情況和健康狀態。
小鼠睪丸間質細胞瘤細胞；MLTC-1 | 小鼠前列腺癌細胞；RM-1 |
小鼠腹水瘤細胞；S-180 | 滾瓶 1700cm2 易握蓋,PS（聚苯乙烯）材質 有刻度 滅菌 袋裝(430852/430853/431134/431191) |
小鼠腹水瘤細胞；SAC-Ⅱb2 | 滾瓶，1700cm2，CellBIND表面，易握蓋，PS（聚苯乙烯）材質，有刻度，滅菌，袋裝 |
小鼠骨髓瘤細胞；Sp2/0-Ag14 | 滾瓶蓋 48mm直徑 易握透氣蓋 滅菌 |
小鼠淋巴瘤細胞；EL4.IL-2 | 滾瓶 850cm2 易握蓋,PS（聚苯乙烯）材質 有刻度 滅菌 袋裝 有刻度 |
小鼠前胃癌細胞；MFC | 凍存管管架，PP（聚丙烯）材質，未滅菌，袋裝 |
小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1] | 離心管支持襯墊，500ml PEI（聚醚酰亞胺）材質,，未滅菌 |
非洲綠猴腎細胞 | 離心管，500ml PP（聚丙烯）材質,密封蓋，滅菌 |
小鼠淋巴細胞白血病；L1210 | 三角培養瓶，125ml，26mm頸瓶直徑，透氣蓋，PC（聚碳酯）材質，滅菌 |
小鼠睪丸畸胎瘤細胞；P19 | 三角培養瓶，250ml，31mm頸瓶直徑，透氣蓋，PC（聚碳酯）材質，滅菌 |
小鼠乳腺腫瘤細胞；C127[C-127] | 三角培養瓶，500ml，43mm頸瓶直徑，透氣蓋，PC材質，滅菌單獨包裝 |
小鼠淋巴瘤細胞(NK靶細胞)；YAC-1 | 三角培養瓶，1000ml，43mm頸瓶直徑，密封蓋蓋，PC（聚碳酯）材質，滅菌單獨包裝 |
小鼠肝癌細胞；Hepa1-6[Hepa1-6] | 大鼠陰道壁成纖維細胞三角培養瓶，1000ml，43mm頸瓶直徑，透氣蓋，PC（聚碳酯）材質，滅菌單獨包裝 |
小鼠神經母細胞瘤細胞；Neuro-2a[N2a;Neuro-2a] | 真空過濾系統，150ml，0.22um，PES（聚醚砜）膜，50mm直徑，滅菌 |
聚苯乙烯通用微孔板蓋角缺口，無菌 | 真空過濾系統 150ml 0.22umCA(醋纖維）膜 50mm直徑 滅菌9(cf 430516) |
一、取材與分離
1. 快速操作
- 組織取材后需立即處理，避免長時間暴露于室溫或非營養環境。
- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織，去除血液、雜質。
2. 消化酶選擇
- 根據組織類型選擇消化酶，避免過度消化導致細胞損傷。
- 消化時間需嚴格控制（通常 10-30 分鐘），可通過顯微鏡觀察細胞解離狀態。
二、培養條件優化
1. 培養基選擇
- 使用含血清或特定生長因子的培養基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分細胞需添加胰島素、EGF 等。
- 避免頻繁更換培養基品牌或批次，減少細胞適應壓力。
2. 貼壁與傳代
- 原代細胞貼壁能力較弱，可能需要包被培養皿（如膠原蛋白、多聚賴氨酸）。
- 傳代時密度建議控制在 70%-80%，過度匯合會導致接觸抑制和分化。
三、污染控制
1. 無菌操作
- 全程在超凈臺操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培養基中可添加雙抗，但長期使用可能影響細胞活性。
2. 支原體檢測
- 定期檢測支原體污染（如 PCR 法），污染后需及時丟棄細胞。
四、狀態監控
1. 日常觀察
- 每天檢查細胞形態、密度及培養基顏色，及時更換培養基（通常每 2-3 天換液一次）。
- 異常形態（如細胞變圓、碎片增多）可能提示污染或營養不足。
2. 傳代與凍存
- 原代細胞分裂次數有限（一般 5-10 代），需及時凍存早期代次細胞。
- 凍存液建議使用 DMSO+血清（或專用凍存培養基），梯度降溫后液氮保存。
