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小鼠表皮成纖維細(xì)胞

【概要描述】小鼠表皮成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:647-V膀胱癌XWLC-05人肺腺癌細(xì)胞XWLC-05+GFP人肺腺癌細(xì)胞EPLC272H人肺腺癌細(xì)胞LTEP-α-2人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1人肺腺癌細(xì)胞HCC-1833人肺腺癌細(xì)胞A549/Tax人肺腺癌耐藥性細(xì)胞Hep 3B2.1-7人肝癌細(xì)胞Huh7.5.1 (STR)人肝癌細(xì)胞

型號: 點(diǎn)擊量:775 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-20
產(chǎn)品詳情

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

小鼠表皮成纖維分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠表皮成纖維采用先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠表皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

組織來源

皮膚組織

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包裝

T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1190

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!

小鼠表皮成纖維細(xì)胞


小鼠表皮成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

準(zhǔn)備工作

1. 實驗器材準(zhǔn)備:準(zhǔn)備無菌的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、移液管、離心管、手術(shù)器械等,并進(jìn)行高壓滅菌或其他合適的消毒處理。

2. 試劑準(zhǔn)備:配制或購買合適的培養(yǎng)基、消化酶(如、膠原酶等)、胎牛血清、雙抗等試劑,確保其無菌且在有效期內(nèi)。

3. 實驗動物或組織來源準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求,選擇合適的動物并進(jìn)行相應(yīng)的麻醉或處死,獲取所需組織;或從已有的組織樣本庫中獲取組織。

取材與處理

1. 取材:在無菌條件下,迅速取出目標(biāo)組織,盡量減少對組織的損傷,并去除多余的脂肪、結(jié)締組織等非目的組織。

2. 清洗:將取出的組織用預(yù)冷的無菌PBS沖洗數(shù)次,以去除血液和雜質(zhì)。

3. 剪切:將組織剪成約1 - 2mm3的小塊,以便后續(xù)消化。

細(xì)胞分離

1. 消化:將剪碎的組織塊放入含有適量消化酶的離心管中,在37℃恒溫?fù)u床或培養(yǎng)箱中消化一段時間。期間可輕輕搖晃離心管,使消化更均勻。

2. 終止消化:當(dāng)組織塊大部分被消化成單細(xì)胞懸液或小細(xì)胞團(tuán)時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

3. 過濾與離心:用細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液,去除未消化的組織碎片,然后將濾液以適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速離心,收集細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞觀察與檢測

1. 日常觀察:每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長狀態(tài)、密度等,記錄細(xì)胞的變化情況,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染或異常,及時采取相應(yīng)措施。
2. 細(xì)胞計數(shù)與活力檢測:在需要時,可采用臺盼藍(lán)染色等方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和活力檢測,以了解細(xì)胞的生長情況和健康狀態(tài)。

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

一、取材與分離

1. 快速操作

- 組織取材后需立即處理,避免長時間暴露于室溫或非營養(yǎng)環(huán)境。

- 使用無菌 PBS 或生理鹽水沖洗組織,去除血液、雜質(zhì)。

2. 消化酶選擇

- 根據(jù)組織類型選擇消化酶,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。

- 消化時間需嚴(yán)格控制(通常 10-30 分鐘),可通過顯微鏡觀察細(xì)胞解離狀態(tài)。

二、培養(yǎng)條件優(yōu)化

1. 培養(yǎng)基選擇

- 使用含血清或特定生長因子的培養(yǎng)基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分細(xì)胞需添加胰島素、EGF 等。

- 避免頻繁更換培養(yǎng)基品牌或批次,減少細(xì)胞適應(yīng)壓力。

2. 貼壁與傳代

- 原代細(xì)胞貼壁能力較弱,可能需要包被培養(yǎng)皿(如膠原蛋白、多聚賴氨酸)。

- 傳代時密度建議控制在 70%-80%,過度匯合會導(dǎo)致接觸抑制和分化。

三、污染控制

1. 無菌操作

- 全程在超凈臺操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。

- 培養(yǎng)基中可添加雙抗,但長期使用可能影響細(xì)胞活性。

2. 支原體檢測

- 定期檢測支原體污染(如 PCR 法),污染后需及時丟棄細(xì)胞。

四、狀態(tài)監(jiān)控

1. 日常觀察

- 每天檢查細(xì)胞形態(tài)、密度及培養(yǎng)基顏色,及時更換培養(yǎng)基(通常每 2-3 天換液一次)。

- 異常形態(tài)(如細(xì)胞變圓、碎片增多)可能提示污染或營養(yǎng)不足。

2. 傳代與凍存

- 原代細(xì)胞分裂次數(shù)有限(一般 5-10 代),需及時凍存早期代次細(xì)胞。

- 凍存液建議使用 DMSO+血清(或?qū)S脙龃媾囵B(yǎng)基),梯度降溫后液氮保存。小鼠表皮成纖維細(xì)胞

小鼠表皮成纖維細(xì)胞

牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free)

牛胚氣管細(xì)胞;EBTr (NBL-4)

牛陀螺狀細(xì)胞;BT

MANNITOL SALT AGAR

牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)

TRYPTONE WATER               500GRAMS

蘭州黑白花奶牛舌尖細(xì)胞;NHBT

CZAPEK DOX LIQUID MEDIUM (MODI500GRAMS

蘭州黑白花奶牛細(xì)胞;NHBN

SALT MEAT BROTH TABLETS (100S)

新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF

CZAPEK DOX AGAR (MODIFIED)    500GRAMS

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE

S S AGAR                      500GRAMS

兔輸尿管上皮細(xì)胞

CORN MEAL AGAR          500GRAMS

小鼠小腸上皮細(xì)胞系

HOYLE MEDIUM BASE             500GRAMS

人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞

COOKED MEAT MEDIUM            2.5KILOS

人腦星型膠質(zhì)正常細(xì)胞

COOKED MEAT MEDIUM       500 GRAMS

大鼠鼻咽癌細(xì)胞

IRON SULPHITE AGAR            500GRAMS

大鼠腹膜間皮細(xì)胞

小鼠表皮成纖維細(xì)胞LIVER BROTH                   500GRAMS

人外周血單核細(xì)胞

DEXTROSE TRYPTONE AGAR        500GRAMS

埃羅妥珠單抗

DEXTROSE TRYPTONE BROTH




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