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兔晶狀體上皮細(xì)胞

【概要描述】兔晶狀體上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H239人非小細(xì)胞豬原代主動脈平滑肌細(xì)胞大鼠原代滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠原代骨髓基質(zhì)干細(xì)胞人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞兔原代腎小球系膜細(xì)胞豬原代卵巢顆粒細(xì)胞人原代肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠原代脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞

型號: 點(diǎn)擊量:453 廠商性質(zhì):代理商 更新日期:2025-03-21
產(chǎn)品詳情

兔晶狀體上皮細(xì)胞

兔晶狀體上皮細(xì)胞

規(guī)格

5×10?

貨號

GOY-01X0695

包裝

T25培養(yǎng)瓶

分類

兔原代細(xì)胞

生長特性

貼壁

組織來源

晶狀體組織


兔晶狀體上皮細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%


兔晶狀體上皮細(xì)胞

兔晶狀體上皮細(xì)胞

兔晶狀體上皮分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞wan全分開;因而,晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并最終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明,晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,包括表皮生長因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。
方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 

兔晶狀體上皮細(xì)胞

一、細(xì)胞培養(yǎng)

1取材 在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,最終保存于液氮中。在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。

二、原代細(xì)胞分離

凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。1懸浮細(xì)胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。2實(shí)體組織材料的分離方法對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

三、細(xì)胞增殖檢測技術(shù)

目前主要有兩種用于檢測細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過直接測定進(jìn)行分裂

的細(xì)胞數(shù)來評價(jià)細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細(xì)胞活力(cell viability)檢測方法,通過檢測樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來評價(jià)細(xì)胞的增殖能力。顯然,細(xì)胞活力檢測法并不能最終證明檢測樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序,但藥物的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時若采用細(xì)胞活力檢測法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量,但我們并不能從藥物干擾組細(xì)胞數(shù)大于對照組的事實(shí)說明藥物可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以最直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。

兔晶狀體上皮細(xì)胞

兔晶狀體上皮細(xì)胞

取材:首先,用培養(yǎng)液濕潤所取的組織材料,并用鋒利的眼科剪去除附在其上的脂肪和結(jié)締組織。接著用平衡液(如PBS或Hanks液)漂洗,再用眼科彎剪將組織塊剪成小塊。多次用PBS或Hanks液漂洗,直到液體清亮、無油滴為止。

接種:用濕潤的吸管吸取切碎的組織塊,輕輕吹到培養(yǎng)瓶皿中,并按一定間距均勻放在培養(yǎng)瓶底壁上。注意不要過多,確保組織塊切面貼在培養(yǎng)瓶底壁上。

培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn),使瓶底朝上,在種植了組織塊一側(cè)的對側(cè)面加足培養(yǎng)液,避免組織塊與培養(yǎng)液接觸,然后塞緊瓶塞。將種植了組織塊的一側(cè)朝上,靜置于37℃培養(yǎng)箱中。待組織塊貼壁1到3小時后翻瓶,使貼壁的組織塊浸沒在培養(yǎng)液中,繼續(xù)靜置。換液:每隔2到3天更換一次培養(yǎng)液,或者根據(jù)培養(yǎng)瓶種顏色的變化確定換液時間。

一、原代細(xì)胞計(jì)數(shù)

將血球計(jì)數(shù)板及蓋片用擦試干凈,并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板上。

將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間。

靜置3分鐘。

鏡下觀察,計(jì)算計(jì)數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按下式計(jì)算:

細(xì)胞數(shù)/ml=4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000

注意:鏡下偶見由兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個細(xì)胞計(jì)算,若細(xì)胞團(tuán)占10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。

二、原代細(xì)胞活力

將細(xì)胞懸液以0.5ml加入試管中。

加入0.5ml 0.4%臺盼蘭染液,染色2一3分鐘。

吸取少許懸液涂于載玻片上,加上蓋片。

鏡下取幾個任意視野分別計(jì)死細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù),計(jì)細(xì)胞活力。

死細(xì)胞能被臺盼蘭染上色,鏡下可見深蘭色的細(xì)胞,活細(xì)胞不被染色,鏡下呈無色透明狀。

活力測定可以和細(xì)胞計(jì)數(shù)合起來進(jìn)行,但要考慮到染液對原細(xì)胞懸液的加倍稀釋作用。

兔晶狀體上皮細(xì)胞


小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1(種屬鑒定)

小鼠氣道平滑肌細(xì)胞ASMC (種屬鑒定)

小鼠髓性白血病淋巴細(xì)胞/小鼠白血病G-CSF依賴性細(xì)胞NFS-60(種屬鑒定)

環(huán)丙沙雜質(zhì)E

人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC(STR鑒定正確)

環(huán)丙沙雜質(zhì)I

人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞ACC-3(STR鑒定正確)

阿奇霉系統(tǒng)適用性對照品

倉鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21(種屬鑒定)

阿莫西系統(tǒng)適用性對照品

小鼠腹水瘤細(xì)胞S-180(種屬鑒定)

諾氟沙雜質(zhì)A

人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞系;HFSF(STR鑒定正確)

諾氟沙雜質(zhì)B

小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-D3(CRL-1934)

頭唑林雜質(zhì)A

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H446(STR鑒定正確)

環(huán)丙沙雜質(zhì)H

大鼠骨髓瘤細(xì)胞Y3-Ag 1.2.3(種屬鑒定)

環(huán)丙沙雜質(zhì)C

小鼠正常肝細(xì)胞NCTC1469(種屬鑒定)

環(huán)丙沙雜質(zhì)B

人肺癌細(xì)胞DMS53(STR鑒定正確)

葡萄糖依諾沙

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞NK-92MI (STR鑒定正確)

兔晶狀體上皮細(xì)胞5-巰基-1-磺甲基四唑(3-TSA)

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H3122(STR鑒定正確)

阿奇霉  含量/用

Transwell-膜嵌套,24mm膜直徑,3.0um孔徑PE(聚酯)膜,TC表面,滅菌

拉氧頭

 


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