人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗,往預(yù)先包被人甘氨酰二肽氨基肽酶捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。
用底物TMB顯色,在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色,顏色的深淺和樣品中的人甘氨酰二肽氨基肽酶呈正相關(guān),用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度,計算樣品濃度。
一、樣本處理要求
、血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 000g離心20分鐘。
二、注意事項
、嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體,溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
4、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
5、不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
人elisa酶聯(lián)免疫試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù),可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。