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豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理

更新時(shí)間:2019-07-17 點(diǎn)擊量:922

豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)技術(shù)原理:
.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2.結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3.酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
4.受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5.此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6.加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。

豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測(cè)試劑盒組織結(jié)構(gòu):
.血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,000×g離心35分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。000×g離心60分鐘去除顆粒。
3.細(xì)胞上清液:000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心33分鐘,取上清液。
5.保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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