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禽類支氣管炎(Bronchitis)ELISA試劑盒技術標準

更新時間:2017-03-28 點擊量:819

ELISA試劑盒價格本試劑盒用于測定禽類血清、血漿及相關液體樣本中支氣管炎(Bronchitis)表達。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中禽類支氣管炎(Bronchitis)表達。用純化的禽類支氣管炎(Bronchitis)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中支氣管炎(Bronchitis)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的支氣管炎(Bronchitis)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。 TMB 在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定標本中禽類支氣管炎(Bronchitis)的存在與否。
試劑盒組成
30 倍濃縮洗滌液 20ml× 瓶 7 終止液 6ml× 瓶
2 酶標試劑 6ml× 瓶 8 陽性對照 0.5ml× 瓶
3 酶標包被板 2 孔×8 條 9 陰性對照 0.5ml× 瓶
4 樣品稀釋液 6ml× 瓶 0 說明書 份
5 顯色劑 A 液 6ml× 瓶 封板膜 2 張 
6 顯色劑 B 液 6ml×/瓶 2 密封袋 個
禽類支氣管炎(Bronchitis)ELISA試劑盒標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA試劑盒價格操作步驟
. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 0µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。 
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5 分鐘.
0. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 5 分鐘以內進行。
操作程序總結:
禽類支氣管炎(Bronchitis)ELISA試劑盒計算和結果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥.00; 陰性對照平均值≤0.0 臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.5 陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為支氣管炎(Bronchitis)陰性陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為支氣管炎(Bronchitis)陽性。
禽類支氣管炎(Bronchitis)ELISA試劑盒注意事項 
.操作嚴格按照ELISA試劑盒價格說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 5-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm 
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。

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