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原代組織細胞的解離

更新時間:2016-08-05 點擊量:916

.用滅菌的解剖刀或剪刀將組織切成3-4mm大小碎塊。用Hanks平衡鹽溶液(HBSS)將組織碎塊清洗數次。
2.加入膠原酶(50-200單位/ml膠原酶HBSS)。
3.在37℃ 下孵育4-8小時。加入3mM CaCl2 可以提高解離效率。
4.用滅菌的不銹鋼網或尼龍網過濾細胞懸浮液,將離散的細胞和組織片段與大塊的組織碎片分離。如需進一步解離,可向組織片段中加入新鮮的膠原酶。
5.通過離心HBSS清洗細胞懸浮液數次。
6.用培養基重懸細胞。計算細胞個數,然后接種細胞進行培養。

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